Re: [求救] annexin V / PI flow cytometry

[nidus (咕嘰)]

感謝大大們的推文及回覆

小弟調過campensate 及gating

但是control都在十字線的右上方  http://0rz.tw/0JzAp

而且圖形也很詭異

請教別的實驗室的學姐

學姊跟我說因為我的細胞是貼覆型的(SW620)

所以不好做  Kit說明書上的圖都是用懸浮型細胞做出來的

她說她自己以前也做過貼覆型的

做了N次都做不出來= =a

想請問有經驗前輩們

做貼覆型細胞的annexinV/PI有甚麼特別的出理方式嗎?

有人做過SW620這隻結腸癌細胞嗎??

謝謝^^



※ 引述《nidus (咕嘰)》之銘言：
: 小弟我用calbiochem的annexinV/PI kit偵測apoptosis
: 染色方法一切都照protocal
: 使用的細胞為SW480
: 上機後
: 除了調votage之外
: 沒有特別調其他的參數
: 跑出來的圖很詭異  如下
: FSC / SSC
: http://0rz.tw/fsT4m
: annexin V / PI
: http://0rz.tw/WhYHa   這個圖跟paper上的差很多
: 會不會是因為我在上FLOW時沒有設Gate?
: 請有經驗的大大幫忙解惑一下
: 謝謝^^

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 114.42.120.103
推 jsi:http://ppt.cc/um,S 這篇論文有做cancer cell annexin V/PI染
→ jsi:色上Flow 實驗方法九及圖12 如果你的FL-1 FL-2voltage調弱一點
→ jsi:讓control細胞群落在左下角10^1與10^1內 應該就是上機的適當條
→ jsi:件了