作者aggaci (台南工作的基隆人)
看板Biotech
標題Re: [求救] 關於western blot
時間Tue Apr 27 20:43:35 2010
※ 引述《sinlu (懶的換暱稱!!)》之銘言：
: 最近才開始接觸western實驗，
: 我們實驗室是使用BIO-RAD的電泳槽跑SDS-PAGE。
: 但是常常在做實驗室發現，
: load完sample後，先調約60V下去跑。
: 卻有時從上膠跑到下膠時會發現sample會漏出來。
: 導致最後量就有點不準。
: 不知道有沒有其他人也有這種情況?
: 該如何做改善?@@
: 謝謝^^
我也遇過這種情形
後來發現是下膠配完時沒有把壓平下膠的水或是有機溶劑吸乾淨所造成的關係
我假設你是這樣
你可以先倒掉大部分再用3mm paper把多餘的溶劑吸掉
應該可以改善
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◆ From: 118.171.124.19
→ yuasa:我從來沒把水吸掉過也從來沒有漏過耶~(至少做過70片以上) 04/28 00:45
推 pipida00:我也從來沒有特別去吸 但是要倒乾淨 上膠TEMED不要加太多 04/28 03:39
→ pipida00:也可能配方或成份有問題造成凝固後嚴重縮膠? 04/28 03:40
推 datro:isopropanol要用d水清洗 然後 上膠不要凝太久 縮太緊會被拉 04/28 07:47
→ datro:起 我都是用pipette吸tube中殘膠 會被吸起來後默數十秒 拉 04/28 07:48
→ datro:用洗瓶潤濕齒梳跟玻璃縫隙 再拉起齒梳 04/28 07:50
→ celestial318:膠沒做好吧 我也覺得是壓平的水沒吸乾 沒遇過就是了. 04/28 16:16
※ 編輯: aggaci 來自: 122.121.206.121 (04/29 00:38)