[求救]關於 長片段的TA-cloning

[DJHINN (dj)]

發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出

以方便板友幫您追蹤問題

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我要將  差不多  6.3k的 PCR product  insert 入  3.6 K的 TA vector

但是  頻頻失敗

目前用過的  莫耳比為

6.3K product : 3.6K vector = 1:3


我是將  vector  當作 insert看待

因為  product>>>>> vector

但是  仍是失敗


有學姊是比較反其道而行

他的比例是

6K product : 3K vector = 8 : 1 (接下來會試看看)

做出來了，  可是我不知道  其理論是甚麼!?

請有做過類似實驗的大大  給個幫助一下  ~"~


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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 59.121.1.64
推 TOTO:把大的insert當作vector，特殊的insert可以換一下cell看看
推 bluecsky:因為你合起來大概快10k 有時候比較大要一點運氣
→ bluecsky:可以嘗試heat shock時間拉長跟recovery時間拉長
推 leoblack:推1F,不要被名稱給侷限了,誰比較長,誰就當vector
推 jabari:primer放切位直接用ligase會不會比較快
→ DJHINN:感謝解答  值得玩味  再試看看