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1. 那個 "雜band" 有沒有可能就是你的 plasmid 本身? 2. 是否你的 primer pair 也會黏到空 vector PCR? 甚至不需要兩個 parimer 都會黏 vector. 只有其中一個 primer 可以黏上 vector, 也就足夠產生另一個 PCR product 了 建議: 1. 增加 annealing temp 看看 2. 用空 vector PCR 看看 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 131.212.202.90
yaliu:2的說法怪怪的喔~一個primer如果只黏一個地方的話 08/18 23:56
yaliu:應該無法大量放大吧~有也可能是一個cycle多一條單股DNA? 08/18 23:58
boblu:另一端黏在(預期中的)insert上啊 08/19 03:54
yaliu:對後~忘記還有insert 08/19 23:56