作者boblu (六百)
看板Biotech
標題Re: [求救] cloning
時間Tue Aug 17 23:28:41 2010
1. 那個 "雜band" 有沒有可能就是你的 plasmid 本身?
2. 是否你的 primer pair 也會黏到空 vector PCR?
甚至不需要兩個 parimer 都會黏 vector.
只有其中一個 primer 可以黏上 vector, 也就足夠產生另一個 PCR product 了
建議:
1. 增加 annealing temp 看看
2. 用空 vector PCR 看看
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 131.212.202.90
推 yaliu:2的說法怪怪的喔~一個primer如果只黏一個地方的話 08/18 23:56
→ yaliu:應該無法大量放大吧~有也可能是一個cycle多一條單股DNA? 08/18 23:58
→ boblu:另一端黏在(預期中的)insert上啊 08/19 03:54
推 yaliu:對後~忘記還有insert 08/19 23:56