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最近再P一個point mutation 的基因 以paper的primer 做PCR 都可以P出產物 如果是mutation 就會有該酵素切位 可沏出不同大小的片段 但問題是 酵素切割都切不出來 是過不同牌子相同的酵素 也無法切出 但確定該病人 是該疾病點突變 想請問: PCR 產物 要先純化後再切割或將切割總體積放大(PCR reagent會影響酵素切割) point mutation PCR是否要用proffreading 的Taq做PCR 因為是point mutation 所以有hetroligus的問題? 有可能P到是normal的一端 但很多篇paper都是用相同的酵素切割 該基因 都可以切出 感謝!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.118.160
biingru:請問你有 postive control 嗎? 08/27 00:18
iwenyo2:不算有,但我拿來做的sample是已經確診的病人了 08/27 00:26
biingru:在實驗的嚴謹上,你應該要有postive c. 這樣才可以幫你解 08/27 01:16
biingru:決問題 08/27 01:16
ararthur:同意樓上 另外你說的是heterozygous嗎? 08/27 01:41