› 看板 Biotech 關於我們 聯絡資訊
作者boblu (六百)
看板Biotech
標題Re: [討論] 請問Western Blotting membrane可以剪嗎?
時間Fri Sep 24 20:47:07 2010
不是可不可以剪的問題 而是 不管剪不剪 一張 membrane 上該有的東西都要有 的問題 有 internal control 是最好 要不然就是剪出來的每一條 membrane 上都要有配 control lane 另外最好也都要有 marker --- 其實比較好的想法是 不是剪 membrane, 而是 "併 membrane" 比方說你原本要 load 五個 well（包含 control, marker) 跑出來染兩個抗體 但是你的 gel 有 10 well 那當然可以 load 雙份然後跑完剪開 各自去染不同的抗體 但是你不能說每個 sample load 兩個 well, 跑完剪成一條一條拿去染 至少需 publish quality 的東西不行 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 71.10.75.57
→ a001ou:可是這樣無法排除人為刻意或非刻意的loading誤差 而若是 09/25 00:47
這就不是剪不剪 membrane 會影響的啦 要靠 internal control 或所有 membrane 作完都拿去染 coomassie blue
→ a001ou:western sample數不會太少 一般mini gel才10 well 能跑 09/25 00:50
→ a001ou:兩份的機會應該不多 09/25 00:50
看原 po 狀況吧 他說的 以剪開membrane 拿去染不同抗體 取代 stripping 所以我預設 gel 夠給每個 sample load 多份 不然沒道理 sample 1-8 跑完，剪開，1-4 拿去染抗體 A, 2-8 拿去染抗體 B 吧？
→ a001ou:還有一般裁membrane不會裁太靠近 應該不會只裁1條lane這麼 09/25 00:52
→ a001ou:精細的裁切才對 09/25 00:53
※ 編輯: boblu 來自: 131.212.202.90 (09/25 03:30)