[求救] invasion assay

[iosteven (iosteven)]

最近利用肺癌細胞株CL1-5要加inhibitor看它的變化

要開始作invasion assay的實驗(我有查過kit 但實驗室有matrixgel老師不會答應買的..)

於是去看了一些的文獻以後有一點不甚了解

就是要coating matrix gel的步驟是

利用6 well的chamber來進行

我看到的流程是matrixgel :SF medium = 1:4 -->這常見嗎?

然後注入一定的量以後等它乾--> 要注入多少量才夠又不會太厚?

有的說放進37度的incubator 1hr，還有是要coating以後放到4度C冰箱 overnight

不知道該如何下判斷?

很多paper沒寫得很詳細= =

請大家幫幫我.... 謝謝



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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 118.171.118.8
→ gryou:我講一下我們實驗是的作法
→ gryou:首先 25%的確是常使用的 但因細胞INVASION能力不同 故也可改
→ gryou:10% 因為我們家是用24well用的CHAMBER 因此不知道量適不適合
→ gryou:100μL/1 chamber/37度西 incubator 6hr
→ gryou:well 跟 well 中間加入 DPBS 使其保溼
→ gryou:這是要避免他太乾 形成凸面 這樣細胞會分佈到管壁旁邊！
→ gryou:incubate 完後 加入 10^5 cells/200μL/1 chamber
→ gryou:然後置入culture media之中 當然這些過程都是要避免氣泡產
→ gryou:生的 希望這樣是有幫助到你！
→ gryou:網路上其實也有http://ppt.cc/W4Sy 可參考的作法！