[求救] 用PCR clone promoter

[roger3112 (我想休息...)]

小弟我最近要用PCR將一段genomic DNA中一段promoter clone出來

但是之前試了很多condition都沒有辦法(溫度，濃度)，

想要請教板上有沒有高手做過這種實驗，可以跟我說一下大概要注意什麼嗎?

我想要clone出來的長度大概是2Kb左右

感謝!!!




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◆ From: 120.126.78.234
推 kaifish:請搜尋一下high GC content PCR的相關文獻
→ kaifish:裡面常出現的方法都值得您參考
→ chaunen:1% DMSO, annealing 溫度用Tm -2  -0  +2去抓看看
→ chaunen:template 濃度 1~2ng genomic DNA /ul 假設PCR體積25ul
→ chaunen:放個50ng以下的genomic DNA