[閒聊] real time PCR 每反應所需最低總體積?

[mzac1b (Goodday)]

現在我用power SyBR, ABI 的儀器在做 real time PCR

由於每個反應總體積越大花錢當然越多

所以想問說實驗可以進行的最低總體積是多少?

反應總體積會影響實驗結果嗎?

目前我用每個反應總體積20ul

感謝您的分享~~



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◆ From: 210.60.122.14
推 nixo:10ul應該還可以，自己試試看吧。
推 mattmatt:10ul影響不大 相對定量的話沒甚麼關係
→ NKTcell:我有問過原廠 體積建議不要太小
推 hek:如果想省錢,自己買sybr green配reaction mix是最省的.
推 spirithorse:我們LAB用 total 15 ul   SYBER GEEN 7.5 ul
推 pocession:理論上來說，體積愈小，pipetting error的影響會愈大
→ pocession:如果只是用來判斷陽性或陰性的話，12左右都ok
→ pocession:但如果是用來精確定量的話，最好還是用25以上，減少變異
→ chiasaiqueen:看用什麼plate。96well的有人用到10 ul total
推 hajimels:我們實驗室 96-well=>10ul 384-well=>6ul
→ joey0422:我也都減半使用 ok的 (lightcycler)
推 bioowen:我們Lab也是用10ul