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最近在跑15% SDS gel時 跑到最後dye跟11kDa的marker之間會有一層淡藍色出現 感覺就像dye暈開一樣 由於我自己的protein為11kDa 做完western壓片後會壓不到band 或是band呈現波浪狀 (感覺protein沒跑完卡在一起的樣子) 要請教各位這是哪裡出了問題 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.154.12
kingtiger:煮protein的時候沒有煮的很完全會造成dye和蛋白分開 02/10 15:57
kingtiger:可用95度以上煮10mins,並立刻跑膠 02/10 15:58
kingtiger:western的部分,若尚未跳海,可再跑開一點 02/10 15:59
kingtiger:有可能你鑄膠時下半的膠凝固的不好 02/10 16:01
kingtiger:跑比較小的蛋白的時候可以考慮做長的膠 02/10 16:01
ayutu7673:個人經驗測漏的水要吸乾,否則跑到底下時會怪怪的 02/10 16:30
ROKEE:個人經驗,高濃度PAGE可是小分子蛋白看不到,是APS不夠新鮮! 02/10 21:02