[求救] Ligation前的CIP是必要的嗎？

[dodomilk (豆漿)]

小弟這次作construct用的是EcoRI和BamHI，切出來是sticky end

比較特別的是，EcoRI切出來的AATT和BamHI切出來的GATC，有兩個bp是一樣的


實驗室的人都建議做vector的CIP，請問有沒有人用這兩種restriction enzyme

不做CIP，接下來的ligation也做得很順利的？


謝謝

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.109.40.39
推 icome:就算不做CIP當然也是做得出來
→ icome:不過我的經驗是 加了CIP幾乎不會挑到self-ligation
→ icome:所以我都會加 後續挑colony比較愉快
→ cloneting:只要RE有切好成功率高 做CIP ligation效率較差
→ gryou:感想如i大 真的是有命中率高！
推 conective:除非你都長不出菌落 不然作一下CIP會比較好挑
推 musicman:我自己經驗是兩端切位為同一酵素就做CIP
→ musicman:如果我是原PO, EcoRI跟BamHI 我就直接ligation了
→ nike77114:同樓上~不過我還是不沒做CIP XDDD
→ aeroufo:direct ligation不做CIP，Single cut做CIP，所以給原PO建
→ aeroufo:議直接ligation就好
→ dodomilk:感謝大家的意見