[求救] RT遇到的問題

[starjim (Jim)]

想請問板上的各位高手

因為我在做RT時，Oligo dT 和dNTP會先混在一起(各0.5ul)

接著再加1ul到各個sample

但現在遇到問題了

由於這次sample較多~因此在我各加完1 ul之後

發現混合的那管還剩下1ul，各個sample加完那1ul之後體績是6.5ul

因此我把pippet調成6.5ul去吸每個sample

發現都剛好~而我也確定我在配olgo dT+dNTP時沒有多配

那假如這部分有問題的話RT做出來會有什麼樣的影響??

謝謝~~





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◆ From: 203.71.94.31
推 Realthugz:體積這麼小 誤差很正常... 前提是你沒有少加一組就好了
推 jk15:我覺得RT的成功與否跟RNA的quality比較有關...
→ jk15:真的怕的話 pipet送去校正吧@@"
→ shenhsu:一定會有誤差的..所以我們實驗室都是多配1管 省點就多半管
→ shenhsu:每管加的量都一樣還有多 總比最後一管少了加不到來的好~
推 cocodo:沒有影響的，敝實驗室pipet的誤差都在2uL以上，還是可以RT
→ cocodo:而且RNA quality比較重要，可以跑個internal control 的PCR
→ cocodo:確認一下RNA qualiry
→ cocodo:我是說RT之後的product  啾咪