作者aggaci (台南工作的基隆人)
看板Biotech
標題Re: [求救] 要怎麼cloning最快
時間Thu Jun 16 22:49:17 2011
※ 引述《spy1015 ()》之銘言:
: 想請問各位,作cloning時拿去定序後
: 發現選出來insert gene有些地方序列有錯
: 請問你們會整個再從pcr開始,重新ligation
: 還是把上次ligation剩下的再重新transform呢?
: 我都挑不到全對的序列,已經用pfu dna polymerase了!
你的所有clone都錯同一個地方嗎
如果這樣那是原本template有錯
錯不同地方還有救
若不想重新PCR
你可以拿幾個錯不同地方的clone
剪掉他們錯的地方再接進對的序列
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單身不代表寂寞,寂寞是走在一個不愛妳的人身邊的時候。
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.121
推 Realthugz:重新做template會不會比較快 06/16 23:09
推 yaliu:我應該會重新PCR~記得用含有校正功能的superTaq或pfu 06/16 23:45
推 FENOR:要用這方法要點運氣 06/17 00:14
→ FENOR:也要兩者之間剛好有可以切的 06/17 00:14
→ yaprint:會不會是基因本身高度變異的位置? 06/17 00:43