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之前配細胞用的medium時 我們都先把DMEM+PS用.22過濾以後 再加入血清 我有牢牢記住前輩跟我說的 FBS會卡在濾網上過不去喔! 啾咪~ 這陣子要用的293FT的cell line 在看使用手冊的時候發現 他叫我把所有的東西都放進medium以後(包含10% FBS) 用.45的filter過濾 這...我應該照做嗎? 還是我跟之前一樣,把其他的東西加一家加濾以後 血清最後再加呢??? 我實在不想浪費貴鬆鬆的材料阿...而且 medium一失敗 我所有的東西就都要重買了 包刮cell line呢... 請大家給我建議 我已經爬過文了 有看到之前某大大用.22過濾結果一直被卡住的例子 難道.45就可以順利的過去??? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 211.86.156.114
roy047:.45>.22 就這樣...... 08/13 11:55
bloodsuckant:那個...我知道 可是我想知道他到底夠不夠大... 08/13 12:03
leoblack:.45過了並非無菌~只能算過雜質罷了 08/13 12:28
machin:推樓上~.45不能保證無菌!何且為啥一定要加血清一併過濾呢? 08/13 13:07
machin:血清如果怕有雜質 可以用離心先離掉~ 08/13 13:09
bloodsuckant:所以就不論他的手冊怎麼寫 我最後再加摟? 08/13 13:36
shenhsu:3,4樓大大 .45真的無法無菌?! 實驗室不能滅的都只過.45耶 08/13 14:52
conective:一般要無菌都是過.22吧 08/13 15:10
conective:.22是比較保險 .45沒實驗過 但是一般來說.22比較貴 08/13 15:11
aggaci:我們lab都加了FBS過.22的filter OK的! 08/13 16:01
machin:樓上要看用哪個牌子的filter,有些聽說容易塞~Orz 08/13 16:02
aggaci:歐歐~的確 我們都用millipore的 一次過5L 不太塞 08/13 17:25
icome:沒有必要 而且一般的FBS都已經過濾過了 都是無菌的 08/13 18:49
gryou:現在很多買來的FBS都是已經去補體+無菌的可以直接用了! 08/13 20:36
gryou:如果怕的話 millipore 還不錯用 costar則是很容易塞住 08/13 20:38
Realthugz:.45應該只是要去雜質而已 就像收virus或CM時 08/13 22:34
leoblack:做cell culture的煩請過.22才能算無菌(但去不了黴漿菌) 08/13 22:36
leoblack:不然就是autoclave,只過.45的只能算去雜質~ 08/13 22:37
yaliu:FBS買來就是無菌的阿,除非解凍過程中產生蛋白質凝結,然後 08/15 12:30
yaliu:你看它很礙眼,那就加入medium過 .22 08/15 12:30
mournermind:應該只是為了過FBS中的雜質 我看過有人這樣過 但是若 08/17 00:37
mournermind:要無菌 45不保險喔 不如FBS不要過 因為他過只是為了 08/17 00:37
mournermind:去沉澱雜質 08/17 00:37
sdgaejr118:其實你可以看你們買的FBS上面是否有註明說已經過濾滅 08/23 01:23
sdgaejr118:菌 如果他有一個像沙漏的圖示就代表已有過濾滅菌 08/23 01:24
sdgaejr118:那就算你不過濾 直接加也可以啦 08/23 01:25
sdgaejr118:如果本身沒有過濾滅菌 那你就過.22的 我過是沒塞住過 08/23 01:26
lucidol:我FBS都直接分裝加入culture中,過濾會把裡面一些東西率掉 08/24 10:31
greendeer: 其實大部分的細菌,size都大於0.5um,因此才會有用0.45 09/07 18:49
greendeer:過濾的做法出現。黴漿菌大概是大腸桿菌的十分之一大小。 09/07 18:52
greendeer:但以我自己的經驗,點22或點45都會長mold 09/07 18:53