作者VieraWei (virgin)
看板Biotech
標題[求救] 關於denature protein的方法
時間Mon Dec 5 11:12:08 2011
各位版上的學長學姊們好,
小弟最近要進行IP的實驗,
我找到的抗體只能辨識denatured form的protein,
所以在進行IP之前,我必須要確保protein已經被denature了。
小弟用的sample是tissue的lysate,
在homogenize的時候是用RIPA lysis buffer,其中含有0.1% SDS,
想請問這樣的情況之下可以確保protein被SDS denature嗎?
如果不行的話,請問有什麼方法可以將lysate中的protein denature呢?
google了一下好像沒有找到相關的protocol,
麻煩版上的學長姊幫忙解惑,小弟感激不盡!
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◆ From: 140.116.253.121
推 joseph103331:你是要做protein-protein interaction還是修飾? 12/05 11:36
→ joseph103331:pp interaction不能讓他們denature喔.... 12/05 11:36
→ joseph103331:真的找不到就建議你用fushion protein來做吧 12/05 11:37
→ joseph103331:至於denature protocol有些IP的有寫 再找找看 12/05 11:38
→ turtle24:抗體加下去也會被denature吧 先透析說不定會折疊回去 12/05 17:01
→ turtle24:換個抗體會不會比較容易設計實驗? 12/05 17:02