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各位版上的學長學姊們好, 小弟最近要進行IP的實驗, 我找到的抗體只能辨識denatured form的protein, 所以在進行IP之前,我必須要確保protein已經被denature了。 小弟用的sample是tissue的lysate, 在homogenize的時候是用RIPA lysis buffer,其中含有0.1% SDS, 想請問這樣的情況之下可以確保protein被SDS denature嗎? 如果不行的話,請問有什麼方法可以將lysate中的protein denature呢? google了一下好像沒有找到相關的protocol, 麻煩版上的學長姊幫忙解惑,小弟感激不盡! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.253.121
joseph103331:你是要做protein-protein interaction還是修飾? 12/05 11:36
joseph103331:pp interaction不能讓他們denature喔.... 12/05 11:36
joseph103331:真的找不到就建議你用fushion protein來做吧 12/05 11:37
joseph103331:至於denature protocol有些IP的有寫 再找找看 12/05 11:38
turtle24:抗體加下去也會被denature吧 先透析說不定會折疊回去 12/05 17:01
turtle24:換個抗體會不會比較容易設計實驗? 12/05 17:02