→ allergy1115:1.pore size 有點大 2.靜至細胞會有重力作用,我自己用 12/12 04:57
→ allergy1115:用5um,多數細胞都卡在pore,下層機呼啥細胞,給你參考 12/12 04:58
→ allergy1115:下層幾乎沒啥細胞 12/12 05:00
各位版友好
小弟想請問transwell使用上的問題
小弟最近在進行macrophage migration的實驗
使用的是corning 24-well 8-um的transwell
首先在上層seeding細胞
待貼附後換serum free medium(200 ul)並且在下層加入含有M-CSF的medium(350 ul)
反應2 hours(也試過24 hours)後刮去上層細胞(用棉花棒)
接著固定染色並割下membrane做鏡檢
然而我發現下層未加入M-CSF的negative control也有大量的細胞...
目前發現可能的原因應該是下層的液體只要稍微蓋過上層的membrane就會滲過去
這樣是正常的嗎 因為如此不就失去原本濃度梯度的效果了
不知是否因為這樣導致實驗失敗
P.S 有確認過下層的液體並沒有比上層well高
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