推 soom:推一個 感謝回來分享！ 12/14 15:51
推 HEK293:推 feedback 12/14 16:24
推 APPswe:推一個 12/14 20:25
推 mesenchymal:恭喜!推 12/15 15:08
感謝各位板友提供意見
這禮拜的caspase 3 (17 kDa)已經有結果了
在這裡把我改的條件po出來給有需要的人參考
protein loading: 150 ug
將PVDF membrane裁開區分pro-caspase 3 (35 kDa)及active caspase 3 (17 kDa)
blocking: 5% BSA in TBS 4度C o/n後將BSA吸走(re-use), 不進行wash直接加1x TBS
1'Ab: rabbit anti pro-caspase 3 (#9662, cellsignal) 1:500 4度C o/n
wash: 0.1% TBST 15 min 3次
2'Ab: anti rabbit 1:2500, 室溫一小時
wash: 0.1% TBST 15 min 6次
ECL呈色
出來的band很清楚 background也蠻乾淨的
再次感謝各位板友提供的意見~~~<(_ _)>
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.125.66
※ 編輯: aken740127 來自: 140.112.125.66 (12/14 15:38)