[求救] Bradford蛋白質定量

[snowwalker (鳥龍綠半糖少冰)]

事情是這樣的

我們家的lysis buffer跟sample buffer的配方皆為

Tris-HCl（pH6.8） 100 mM
Dithiothreitol（DTT） 200 mM（P.S 要用時才加入）
SDS 4 ％
Glycerol 20 ％

不過之前沒有注意到裡面的SDS濃度為4%

所以買了Bradford protein assay

請問大家有任何改進的方法呢?

降低SDS濃度有無影響呢?

或者有無任何SDS的替代品可用

謝謝

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 203.71.94.11
推 martyrtitan:稀釋後看和ddH2O吸光值差多少吧
→ martyrtitan:我用7M urea 2M thio-urea 還有0.005%BPB 稀釋50x
→ martyrtitan:和水的吸光沒差
→ even2300471:測吸光值用Beer's law換算蛋白質濃度
→ snowwalker:比較好奇的是檢量線也是要用sample buffer去配嗎?
→ snowwalker:還是用ddH2O去配就好了?另外用96well的線性範圍是?
推 martyrtitan:STD用水就好 變成Sample減去lysis(稀釋的) STD減水