[求救] 測jurkat產IL-2 cytokine

[bearyuan (熊熊)]

各位先進大家好,

最近第一次養實驗室的jurkat細胞,

實驗目的是想要加藥後測藥物抑制jurkat細胞產生IL-2細胞激素的效果

我將2*10^5細胞加到96 WELL,再加藥反應24小時後,取上清液用EILSA KIT測IL-2的濃度

但我現在碰到的問題是,連沒加藥的control組,都測不到IL-2

KIT應該沒問題,因為可以拉出很漂亮的檢量線

是有看到有人會先活化Jurkat細胞,

可是因為這個是離開很久的實驗室同仁有做過的實驗,我確定他沒有先活化細胞

就是培養後,直接加藥做

我也覺得,就算沒有活化,也至少會測到一些數值吧,可是我是完全沒有測到

有大大做過類似的實驗嗎??或是有大大直接測Jurkat產IL-2嗎??

謝謝大家

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 220.135.237.35
推 kirby0415:condition medium中的IL-2含量大概多少?需要濃縮嗎?
→ kirby0415:cytokine量太少 有時要用Amicon濃縮一下 才測的到
→ kirby0415:如果含量真的很少 有一些ELISA Kit號稱非常sensitive
→ kirby0415:也許也可以試試看~
→ kirby0415:總之要先確定你沒加藥的Jurkat 一定要分泌IL-2
推 mckendri:jurkat不是需要activate 才會大量產IL-2?
→ mckendri:ATCC網站有介紹 去看看吧