推 hangzer:同意 想辦法讓protein變成dimer會比較有意義 投稿也比較穩 02/24 17:31
我想原po應該不是要做出兩種monomer
他的意思是用一條蛋白模擬homodimer吧
不過老實講
大概是不太可能
因為GVLIRS跟SRILVG是完全不同的東西
由於蛋白質有chiral centre這個東西
(這也就是為什麼蛋白質都是從N端讀到C端)
假設你的胺基酸都是L form(in vivo狀態下)
後半個模擬monomer的sidehain的方向會全部不對
構型會完全毀掉
我個人認為你最好的解套方式就是在酵母裡面大量表現GVLIRS這個monomer
然後祈禱它會在菌體裡面作用變成dimer
※ 引述《tsubasawolfy (悠久の翼)》之銘言：
: ※ 引述《Johnpolo (交換人士)》之銘言：
: : 沒錯 兩個蛋白尾端會互黏 但要想要把這個序列接在酵母菌上
: : 直接轉譯出來 中間放切位 但問題是我只有5'至3'的序列
: : 我要如何製造出3'~5'的序列 總不能直接倒過來 那轉譯出來蛋白完全不一樣
: : 比方像這位版友講的一樣 5'~3' ATG GTC TAC TAT TCG AGC
: : Amino Acid U V W X Y Z
: : 但直接倒過來變成3'~5' CGA GCT TAT CAT CTG GTA
: : 那轉譯出來的蛋白完全有問題。
: : 所以我想要的東西是
: : 5'~3' ATG GTC TAC TAT TCG AGC 切位 AGC TCG TAT TAC GTC ATG
: : Amino Acid U V W X Y Z 切位 Z Y X W V U
: : 所以後面這段顛倒序列(AGC TCG TAT TAC GTC ATG)如何做?
: 作者的 你的
: N'-ABCDE-C'┐ N'-ABCDE-C'┐
: N'-ABCDE-C'┘ C'-ABCDE-N'┘
: 這樣還要先說服別人你的DIMER跟自然的DIMER是同功能 畢竟這算兩種不同蛋白了?
: 至於如何做出反向 大概只能想到人工合成短的 再慢慢接?
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