推 crazybrian:genomic DNA濃度也有影響~可以稀釋看看 03/24 18:00
推 Ianthegood:annealing加長有時候會有用 03/24 19:42
→ sylvialalala:我的dna濃度只有20~70 ng,這樣還需要稀釋嗎? 03/24 21:50
→ sylvialalala:另外爬文有看到增加denature的時間,請問這樣有用嗎 03/24 21:50
→ keepseaching:你的Tm值是幾度阿,會smear有可能是primer專一性不夠 03/25 02:30
→ keepseaching:若這是要用在construct上,只能加長primer提高Tm值 03/25 02:32
推 micocat:可以試試看提高denature溫度 98度之類的 03/25 10:18
推 lesswind:還是你要分兩段夾... 03/25 13:57
推 joseph103331:genomics這個濃度可能還太高 kapa不是有說明書? 03/27 11:45
→ joseph103331:看看上面怎麼寫 PCR煩就煩在一定要做出來才知條件... 03/27 11:45
→ sylvialalala:tm 55 P不到後改50又p到太多~所以目前用53,54度 03/27 21:17
→ sylvialalala:kapa上面沒有特別說,但我有去看他的example濃度差 03/27 21:18
→ sylvialalala:不多說~目前有提高denature時間但不敢提高溫度怕酵 03/27 21:19
→ sylvialalala:素失效~ 03/27 21:19