推 icome:singal peptide是真核細胞的東西 對E.coli而言沒有特殊意義 04/05 18:59
→ icome:打錯 signal 04/05 18:59
→ icome:還有 膜蛋白建議去掉transmembrane region否則容易變不可溶 04/05 19:00
推 darit:原核細胞也是用的到signal peptide 04/07 13:24
→ darit:如果你要表現在periplasm的話就需要 04/07 13:25
我先敘述問題原因
之前有先用pET28 vector成功轉殖上我的目標基因
因為後續做時發現我的目標基因，為膜蛋白,必須要有特殊的信號序列
因此要把目標基因改接在pET22 vector上。
當初pET28在做時His tag是放在前端並且我的目標基因前面有一大段
不是該基因的序列,這樣我能將pET28用酵素把我目標基因切下來,放入pET22上嗎?
後續蛋白表現時我的目標基因前端的序列會影響到我蛋白表現嗎?
或者還有其他更好的辦法呢?
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.176.215