推 aggaci:我從來沒加過DNaseI trypsin那步溫和搖晃即可 04/24 01:34
推 latte366:感謝 不過我做primary glia cell culture加不加有差耶 04/28 22:17
→ latte366:不過還是謝謝大家的建議 ^^ 04/28 22:18
推 kattyhouse:謝謝L大~我終於找到我primary culture充滿鼻涕的原因了 05/17 22:04
※ 引述《latte366 ( )》之銘言：
: 大家一般用量是每多少mg的tissue加多少量的DNase I去作用?
: 同樣的作用原理用在cell line的culture應該也OK吧? 只是用量可以減少?
: 還有大家有買過哪家的比較便宜的嗎? 價格/per unit
: 爬過文沒有看到相關的資訊
我用sigma D4527，應該有更便宜的。
我覺得經驗比你算半天還有用，如果過程沒有傷到太多，我有遇過不加都可以過40um，
但有時太暴力，就算加兩倍還有鼻涕XD
另外就是保存的問題，來回解凍或是配太久效力會下降，我第一次買新的用，
其效果之強令人驚豔，就算把量降到50%，都能在一分鐘內把鼻涕給弄不見。
另外一個小插曲：D4527有說要二價離子輔助，但有一次我白目拿到有EDTA-trypsin
去處理tissue，不用說，鼻涕一下就堵住篩網了，就算我DNase加到兩倍量都沒用。
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起初，他們追殺共產主義者，我沒有說話，因為我不是共產主義者；
接著，他們追殺猶太人，我沒有說話，因為我不是猶太人；
後來，他們追殺工會成員，我沒有說話，因為我不是工會成員；
此後，他們追殺天主教徒，我沒有說話，因為我是新教教徒；
最後，他們奔我而來，卻再也沒有人站起來為我說話了。
《First They Came（他們首次來時）》，Martin Niemoller牧師（1892-1984）
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