→ a90648:六個小時太短了.... 05/04 18:25
推 TAKONA:應該六小時換medium隔天再觀察吧 05/04 19:1
請問是換成complete medium 嗎?
※ 編輯: a213a21 來自: 163.13.115.17 (05/04 19:37)
→ a90648:是 05/04 19:45
推 kevin1983:post-transfect 24~48h 是轉錄作用的最高峰 05/04 21:59
小妹最近開始做MCF-7 transfection 的實驗
因為要先抓條件
所以將一個帶有GFP的plasmid DNA transfect 到 MCF-7 裡
使用6-well
4ul plasmid(0.5ug/ul) + 6ul lipofectamine 2000
最後的總體積是 2 ml (皆用serum free 的 DMEM/F12 )
6小時後觀察
結果transfection的效率很差
在顯微鏡下幾乎沒有看到綠色螢光
在google上找到的protocol 也是效率很差
想請問板上的高手們
有人做過MCF-7的 transfection 嗎??
是我的plasmid:lipo 的比例抓錯嗎?還是有甚麼需要改進的地方?
實驗一直卡在這無法繼續做下去真的很焦躁阿!!
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