[求救] HUVEC出現不明原因死亡

[premire (熱騰騰的泡麵)]

小弟最近養HUVEC遇到一點問題  就是將解凍的細胞（第四代）養下去後

隔天換新鮮medium 觀察細胞均有貼盤 (大約6成滿）

 但第二天再來看就漂給我看了==

medium肉眼看是混濁  一開始懷疑污染

於是有放三組：medium, medium+PBS, medium+PBS+gelatin(1%)培養兩天

但是肉眼看或是顯微鏡都沒看出什麼問題

後來想到當初配medium因為ECGS來不及買  有和其他間實驗室先借

由於這次是死第二次了  而且是同一罐養的

突然想到會不會是ECGS不新鮮（sigma建議2-8℃保存）

不新鮮的意思猜測是可能是幾個月前買的（這部分想說明天來問）

但最近有畢業壓力 想說假如是ECGS問題 可不可以將原本2-3天換medium的頻率

縮短為1天就換  雖然很耗medium 但也只能苦撐了

希望版友們也可以提供一點意見

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 210.60.122.10
推 jsi:解凍的細胞本來就有汙染?
→ untilnow:解凍的細胞本來就有汙染＋1
→ isntangel:原來還有ecgs不新鮮~這個原因@@
→ premire:我後來詢問ECGS的QC日期是2009.4, 原廠兩年後會再做一次QC
→ premire:若QC不合格或是原批號沒貨就會重作一批, 但三年前的藥物可
→ premire:已經失效了吧==
→ petcat0410:解凍的細胞本來就有汙染＋1