作者philidov (威廉大帝)
看板Biotech
標題[求救] ELISA讀值都一樣 該怎麼辦?
時間Mon May 14 12:10:00 2012
最近在做ELISA的測試，plate上面的substrate是自己coating的
因為要測試一抗的濃度定量，所以我coating了10ug/ml的substrate下去，
但是測試的結果不管抗體濃度是4ug/ml一直稀釋到30ng/ml,OD450的值卻一直在差不多0.5
左右……
這樣是代表我的binding沒有這麼好嗎? 我是否要再增加coating的量呢?
但是OD450卻又沒有飽和，很難解釋的結果……
想要請問一下各位的意見 !!! 感謝!!!
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◆ From: 210.202.80.48
→ trumpet:二抗會不會有non-specific binding?? 05/14 12:41
→ philidov:應該不會,因為二抗是anti-human的 (一抗是human) 05/14 13:13
→ goshr:有沒有blocking呢, 留一孔不要coating的一併試看看 05/14 13:37
→ philidov:有blocking, 是在測試某種抗體藥物的濃度測定方法~ 05/14 14:16
→ trumpet:放一孔不加一抗直接加二抗確認一下 05/14 15:12
→ philidov:OK 感謝各位~ 正在測試中! :) 05/14 16:05