作者Blibra1002 (man)
看板Biotech
標題[求救] IF免疫染色的E-cadherin怎麼染才好??
時間Mon May 14 15:32:11 2012
之前做過其他蛋白的免疫染色 都還滿順利的
pattern也都很OK
最近開始染細胞的E-cadherin
可是都沒辦法像是paper上別人拍的那樣
表現在細胞膜上很清楚的一圈
而是cytosolic的pattern
目前固定的方法 formadehyde 酒精固定都試過
抗體用的是santa cruz 他的datasheet也有放IF的圖 看起來也是膜上
細胞的話有查過別人的paper 這株細胞應該做得出來
而細胞也像paper上寫的 種約3-4分滿
長兩天 形成colony之後去染色
請問有做過EMT的人 幫忙一下嗎??
感激不盡喔
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◆ From: 140.128.67.245
→ genep:細胞是? 細胞之間有緊密連結嗎? 05/15 00:50
→ Blibra1002:細胞是du145 細胞有形成一團團的緊密連結 05/15 01:11
推 tchan:試試看細胞不要打洞或許可以喔!!!! 05/17 10:47
→ alicialai:用FA做固定的話可以試試看加個Antigen retrival步驟 05/17 21:18
→ theowing:我們實驗室都稱Santa Cruz為Santa Crap... 07/20 04:47
→ theowing:以前試過HUVEC 用Alexis染VE-Cadherin IF蠻漂亮的 07/20 04:49
→ theowing:2% PFA固定15分鐘 07/20 04:49
推 kattyhouse:可以請問PFA fixed是在37度還是室溫嗎? 08/17 21:29