[求救] 蛋白質加SB煮後還有辦法定量嗎?

[raiyu (ラルクは信仰)]

昨天匆忙之下 把定量的蛋白質sample打翻了 OTZ

但其他的已經加sample buffer煮了

還有辦法定量嗎? (我們是用BCA法)

還是只能跑WB後用nternal control去比對校正?

(面壁思過中)

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.24.245
推 Rarelay:除非你想要重新沈澱把 SDS, Dye, 還原劑拿掉再定量
推 shenhsu:加了SB的sample我們是用10%TCA沉澱 再以少量0.1N NaOH回溶
→ shenhsu:之後加水稀釋後即可以bradford定量
請問這樣處理後的sample可以用BCA法定量嗎? 還是只能用bradford??
→ hek:可以把protein點在filter上，再用coomassie blue染，與BSA
→ hek:standard比對，即可得濃度。
※ 編輯: raiyu           來自: 203.77.69.73         (06/01 21:14)
→ illicaw:Thermp 有賣一套BCA (Reducing Agent Compatible)
→ illicaw:可以在加了sample  buffer之後測濃度
→ illicaw:是Thermo > <
推 nzj:datasheet都會寫耐detergnets的濃度,如果蛋白質濃度高可以稀釋
→ raiyu:謝謝各位高人~ 我研究看看