[求救] EMSA

[erse (禮拜天的下午)]

發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出

以方便板友幫您追蹤問題

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   各位版友大家好~

   最近在做EMSA相關的實驗

   發現一個問題 我純化的蛋白若加入越多

   band 就會 shift的越高 請問該怎麼調整呢? 我的probe長度 200bp

   用的是6% native gel

   想法:  1. multiple binding sites?
          2. oligomerization?
          3. probe太長? 改小一點?
          4. poly dIdC 多加一些?

   先謝謝大家了!!!^^ 只差這個問題 老闆就可以接受我的實驗了><

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.109.55.233
→ milkpa:問題在於你想看什麼，蛋白越加shift越高表示 a)有多個蛋白
→ milkpa:結合序列，b)有non-specific binding，有不同解決方式
→ erse:請教一下 若是nonspecific binding要如何解決呢? 謝謝^^
推 olpo:EMSA只是很粗略的實驗  大概看兩者有無interaction
→ olpo:要如何區分專一或非專一是看不出來的