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想請問一個問題,壓caspase-3,proform的有壓出來(黑band), 但是actived caspase-3 的band是白色的, 正負片沒有調, 壓caspase-9(黑band),沒有這問題, substrate的反應時間也很少,說是過量反應的話,也很奇怪! 想知道是哪裡出錯了! 麻煩各位了!感激不盡! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.101.28.119
Realthugz:誰告訴你說短時間不會爆炸的... 07/06 23:33
owl628:蛋白量很多的話短時間還是會過量反應阿 07/07 00:58
joseph103331:加太多 不到一秒就爆了 07/07 21:07
sancra:我碰過很多ab是ECL一加下去,就亮了,肉眼可見 07/08 01:05
aeeaee1128:一抗濃度再降低,有回收使用的話再加buffer稀釋吧~ 07/08 01:24
knell:同意爆炸+1~ 07/09 11:04
umijuki:我是生技公司的廠商,band會反白大多會是跟你的ECL反應太 07/10 20:08
umijuki:快速,訊號一下衝上去你的蛋白就燒掉了,一秒也會爆哦~ 07/10 20:09
c1314205:爆的話也很奇怪,因為是切出來的,如果會爆,那PROFORM的 07/10 21:41
c1314205:也會爆了,因為量比較多。目前是將1抗稀釋2000倍, 07/10 21:43
c1314205:proform的背景不在那麼深,可是cleaved 卻沒壓出來。 07/10 21:46
icome:substract快速被消耗導致沒訊號 07/12 12:40
Anvec:pro- 跟 actived form 是同一支抗體嗎 如果是不同支抗體 07/14 19:11
Anvec:可能要調整一下抗體的 titer 如果是同支 通常 act-form 量少 07/14 19:11
Anvec:比較難壓出來 有圖可以給大家看會比較清楚是壓沒有還是反白 07/14 19:12
silentence:白是反白還是空的? 如果是空就是active form不多 07/14 21:02
silentence:反而是要壓久點 07/14 21:05
c1314205:19&set=a.265618446885587.60812.100003123028856&type=3 07/25 14:34
c1314205:&theater 很抱歉,因為不知如何縮網址,抗體是一樣的! 07/25 14:35