[閒聊] 有關PCR的taq enzyme

[likemsn (是喜歡msn不是喜歡男生)]

小弟算是作PCR實驗的新手

作實驗作了一段時間後

發現作PCR的 taq enzyme是一個很奇妙的東西

我們家作實驗時會把PCR buffer，dNTP mix，primer和taq先加在一起

之後在"放在冰上"操作

可是據小弟瞭解，taq不是一種很穩定的東西嘛?

它連九十幾度高溫都可以忍受

那為啥不能在室溫下操作?

而且保存時都要放在-20度

這個問題我想了很久，不曉得有沒有高手可以幫我解答

感謝~








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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 210.60.122.160
推 huuban:室溫操作可以啊，只是因為是酵素，當然要保護它囉
→ huuban:基本上Taq運送的時候是室溫在運送的..
→ forWinds:恩 以前常聽老師說Taq太少的話PCR後期死光就沒了
→ ashiniii:能忍受高溫不等於穩定
推 qiet:能忍受不代表Taq在那個溫度很開心很穩定 還是會壞的
→ qiet:而且一管taq可能會用很多次 所以才要放在冰上
推 batatas:90多度可以忍受 可是還是有其壽命 所以你看一般taq都會說
→ batatas:45cycle後或72度長時間後 其活性就衰減
推 jabari:       Taq:  啊啊啊~~ 要壞掉了~~
推 Realthugz:我有聽說你這樣搞會有non-specific binding
→ WinnieDad:其中一個重要的原因是低溫下可避免不想要的反應發生，譬
→ WinnieDad:如樓上提及的non-specific binding。
→ likemsn:感謝各樓層大大精闢的解析~我再消化一下~^^
推 icome:沒錯 放冰上是避免非專一性反應 有hotstart可以放室溫