[求救] RNA轉RT時忘記加RT enzyme

[starjim (Jim)]

利用的是fermentas的kit

RNA要轉cDNA時加了dNTP、oligo dT、5Xreaction Buffer

但這次我忘記加了RT enzyme就直接跑了

等跑完RT後 跑PCR發現都沒有band 回想起來才發現忘記加RT enzyme

RT的作用時間是42度C 60分鐘，70度C 5分鐘

我想請問的是可以把之前跑出來的RT product加入enzymeme後再跑一次嗎

因為我的RNA不太夠再跑一次RT...


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◆ From: 111.250.35.198
推 Realthugz:...RNA還活著嗎
→ RickyKckao:應該degrade完了吧...
→ Ianthegood:不加白不加 sample比enzyme還值錢阿(誤)
推 huuban:重抽RNA
推 llod:所以RNA剩多少?你把體積放大再試ㄧ次reaction,不過我猜RNA
→ llod:已經死光了
→ blence:除非你正常RT完20ul體積全部都拿去跑PCR,不然剩下的RNA怎麼
→ blence:會不夠？可以看一下RT kit提到的RNA最低用量,應該夠用才對
推 joseph103331:至少....有個negative control....
推 icome:品質已經不好了 重做吧 免得後續浪費更多時間
推 nike77114:重作。不要浪費時間