[求救] SDS-PAGE分離tissue lysate

[Shinn826 (始終都是獨自一人)]

我的實驗步驟大略是

先將組織用lysis buffer萃取tissue的蛋白質

lysate先用50kDa的centrifugation脫鹽兼分離，再用30kDa的再次分離。

因為我的目標物在MALDI-TOF中，其碎片訊號為10.9kDa，此訊號出現在30~50kDa的lysate

裡。

想請問有辦法利用SDS-PAGE分離出這範圍的protein嗎?

我該選用幾%的separarte gel?

在發問之前我有試跑過幾片，實驗室學長是說marker等產data再加，所以我是跑一些

standard、30~50kDa、大於50kDa。其中30~50kDa和大於50kDa有重疊的band，會有可能

是分子量太接近導致跑不開嗎?

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◆ From: 140.128.123.62
推 joseph103331:看marker分離的程度不是比較準嗎? 就連standard一起
→ joseph103331:試阿 作一系列的PAGE圖以後實驗室就都可以參考了吧
→ joseph103331:不然每次都還要try 省個marker的小錢沒多大意思orz
我的實驗室內有的marker，外盒和說明書都被已經離開的學長丟了，根本無從得知。
要新添購marker可能還要好一陣子Orz
※ 編輯: Shinn826        來自: 140.128.123.62       (09/19 14:54)
推 alaric:marker說明書, 去原廠網頁找PDF檔或說明網頁.