[方法] 冷凍切片 組織處理

[caesar0926 (嗚哈哈)]

各位先進!!!!!

想請問大家
欲冷凍切片的組織取下後會固定嗎?
我是打算用4%PFA固定但 是似乎會對日後染色有所影響
雖說不是每隻抗體都會影響，但保守考量之下
想請問其他固定方法 acetone是否可以作為固定液 在使用上需要注意什麼?

另外 常看到會有蔗糖脫水的步驟
想請問這步驟是必需的嗎?若不脫水會造成什麼樣的影響?
因為實驗室一些人似乎也沒有做這個動作

麻煩各位!!謝謝大家

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◆ From: 111.242.80.80
→ vandia:PFA對免疫染色的影響比較小,別用acetone
推 leoblack:推樓上~目前對染色影響較小的還是PFA~
推 susu8n0:不脫水冷凍後組織中有冰晶，切片會坑坑洞洞
→ goshr:要用PFA固定的話, 何不做石蠟切片呢 ^^
速度比較快，目前我用的是臘切，我的認知石蠟和冷凍切片的抗原完整度還是有差?並且在
paper上我的sample大多還是以冷切為主
所以想試試看冷切
推 vandia:石蠟要加熱,有些抗體會認不到...
謝謝各位!!!!!!!
※ 編輯: caesar0926      來自: 111.242.80.80        (10/08 00:09)