作者Rodolfo2010 (雷米亞茲)
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標題Re: [求救] Sorbitol的功能?
時間Fri Oct 12 21:22:45 2012
※ 引述《kobeiloveyou (我超強暴)》之銘言：
: 大家好
: 在抽酵母菌DNA時
: 有的方法會在破菌的buffer加入sorbitol
: 想請問加sorbitol的功能是?
: 是維持滲透壓嗎? 但抽DNA都要破菌了 還維持滲透壓做什麼
: 希望有人可以幫我解答 謝謝!!
加sorbitol就是要維持滲透壓
你這方法應該是要配合Zymolase先分解細胞壁
等細胞壁被分解後 離心沉澱原生質
去上清後 再利用含detergent的buffer將細胞打破
如此可以取得量多質優的genomic DNA
所以在分解細胞壁那步驟時 buffer中要含有高濃度的sorbitol (1 M)
這樣細胞膜才不會先漲破
希望有回答你的疑問
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◆ From: 118.171.120.108
推 kobeiloveyou:謝謝!!那細胞膜再破細胞壁那步驟先漲破 DNA會怎樣嗎? 10/12 21:36
推 kobeiloveyou:之後不是也要破膜,分解細胞壁時也能破膜不是比較好 10/12 21:43
→ Rodolfo2010:Lysis buffer通常體積比較大,如果直接讓DNA跑出來, 10/12 21:43
→ Rodolfo2010:那DNA濃度不就變稀了? 10/12 21:45
→ Rodolfo2010:更何況Lysis buffer的環境不適合溶DNA 10/12 21:46
推 kobeiloveyou:瞭解了謝謝! 10/12 21:52
推 TW185930:推 10/14 13:10