[方法] wound healing assay

[fablissful ()]

最近要開始做這項實驗

想請問各位有經驗的大大們~

基本上在做轉移會先做invasion再做migration

我之前都是用transwell來做這兩項實驗

時間點都是做一樣的  都是以對細胞不致死的濃度去做


不過現在要做wound healing就想請問時間點是否也是一樣呢?

還是有要特別多還是跟invasion一樣?

會煩惱是因為之前invasion跟migration都是用transwell所以才會一樣

因此現在換wound就要更改時間點?




另外拍照過後是要用如何來定量呢?

因為第一次做這項實驗 PAPER寫的也沒有很詳細

所以上來請教各位大大

(跪拜)

感謝大家了

以上

感謝各位

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.104.95
※ 編輯: fablissful      來自: 140.120.104.95       (10/16 12:02)
※ 編輯: fablissful      來自: 140.120.104.95       (10/16 13:05)
推 HEK293:一般來說，transwell是做invasiveness，wound healing是
→ HEK293:migration/motility吧...
推 vancent:transwell不COATING MATRIGEL也可以算MIGRATION
→ fablissful:請問要如何定量呢?單純拍照就好,還是要下載特定軟體?
→ fablissful:感謝各位了:)
→ vancent:上層細胞擦掉以CRYSTALVIOLET染色後在顯微鏡下拍照
→ vancent:之後取隨機三視野做IMAGE J的定量 再做BAR圖即可
→ vancent:要染O/N效果比較好 最好先用formalin fix