作者nk12914 (等待)
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標題[求救] 請問有人試過將IHC重新strip後染色的嘛
時間Thu Oct 18 18:24:15 2012
聽學長說IHC的片子染完後可再strip,重新染Ab
上網看到其中一篇paper用了好幾種strip buffer,分別去比較他們的效果
Antibody elution method for multiple immunohistochemistry on primary
antibodies raised in the same species and of the same subtype.
J Histochem Cytochem. 2009 Jun;57(6):567-75.
當中利用Glycine-SDS pH=2 50度C incubate 30 mins效果最好,所以想說試試看
不過現在遇到一個問題
當初用的是水溶性封片膠,所以把片子放到水裡過沒多久蓋玻片順利脫落
但因先前技術不好,封片封太厚,導致蓋玻片掉落後,還是明顯看到一層膠在上面
想說再繼續泡著是不是可以讓膠溶掉,但那層膠還是存在
也試著放在37度C incubator,但效果也不好
主要是擔心那層膠的存在會影響後續的染色?
還是說當我在strip的過程中,因為buffer pH=2的關係,所以那層膠也可以跟著被溶掉呢?
不知道有沒有板友做過類似的實驗,可以提供一些經驗嗎?
感謝大家了~
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◆ From: 120.126.51.17
→ nk12914:我用的封片膠是Dako Faramount Aqueous mounting medium 10/18 18:43
→ vandia:還要strip你就別封片了,直接PBS看完拍完就可以繼續下一個 10/19 15:04
推 abcam:strip完後 要再染的到protein 真的是機會機會了!只能try~ 10/26 16:41