[求救] 請教PCR product電泳遇到smear該如何解決

[sjacky (陳小文)]

各位先進 大家好

最近在PCR上遇到瓶頸，實在無法解決，所以上來請教各位

如圖一 http://0rz.tw/dblVc
10(A primer)  11(B primer)  12(C primer)的部分先前所作之PCR product當作
positive control

Reagent、ddH2O、Primer(5’- lable DIG)、Buffer均已換新

圖二 http://0rz.tw/NCaHd
8(A) 9(B) 10(C)的部分為新做的positive control，在10的部分出現了smear，
而5(A) 6(B) 7(C)的部分為NTC，5(A) 7(C)的部分很正常，而6(B)的部分也出現
了smear，不管是有沒有加Sample或是H2O，只要有B這組primer就會出現smear。

請問這個情形下，大家為什麼會出現這樣況狀？

Primer為剛新訂回來的

萬分感謝

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 114.38.226.41
推 aggaci:smear=>降低鎂離子濃度
→ meder:沒加sample也會有smear?
→ sjacky:是的！primer錯配？
推 chuenwon:anneling溫度調高 ??