因為實驗室剛開始做cortical neuron的primary culture...
所以想跟版上前輩們請教
是取出生24hr內SD Rat 的cortex 使成為 single cell
再利用DMEM/F12+10% FBS 培養24hr後
才換成DMEM/F12+B27+Ara-C (10uM)
並且會另外添加鉀離子(K+)使Medium中的鉀是20-30mM
culture在PDL(poly-D-lysine) coating 的coverslip上 (cell density是2X10^5)
但是細胞會在1週內死亡
(4-5天會有morphology的change會有細胞空洞並且有凋亡的現象)
但一般都可以培養2week以上...
請問有前輩知道是哪裡有做錯的地方嗎??
謝謝
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