[方法] Heat-induced epitope retrieval

[McCabe (姓消名遣字無聊)]

最近在嘗試免疫染色, 一直染不太上去.
雖然懷疑抗體本身有問題, 老師確很肯定的說抗體沒問題.
問題有可能在過度的固定.
那麼, 就得操作所謂的Heat-induce epitope retreival
請問這邊有人有這方面的經驗嗎?

聽說就是把切片放進去特別的溶液中煮一煮?!

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 114.47.160.151
推 caesar0926:上網antigen retreival 很多捏
推 CD133:antigen retrieval本來就是IHC的關鍵步驟，不同的抗體、組織
→ CD133:以及固定方式，都需配合不同的retreival方式。
推 goshr:FFPE的切片, 都要經過antigen retrieval的步驟
→ goshr:不同的抗體有不同的方式, 看看說明書裡有沒有說囉, 否則要試
→ goshr:建議先從citrate pH6開始試, 再試EDTA pH8, tris-EDTA pH9
→ goshr:太強的retrieval可能會造成false positive喔
推 lupeashn:Proteinase K 也是其中一種方式!也可買Comercial kit來試