[求救] IHC無法呈色

[isatin (蝶與花)]

版上大家好

我在作IHC遇上瓶頸
所以想問問看大家的意見

我是使用collagen I當作一抗
condition也都確認好，也有成功染色

但是從某一天，我即使用一樣的Porto cal
DAB卻無法呈色，即使拿之前positive的tissue也不行

想請問大家有這樣的經驗嗎？
或是我在過程中忽略了什麼
我想破腦袋了也找不出原因

拜託大家了！


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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 180.204.125.191
→ lupeashn:DAB+現泡比較好喔...不然呈色效果差!
→ isatin:我都是現泡的@@
推 goshr:H2O2是自備的還是DAB kit裡的? 換新鮮的H2O2試看看
→ isatin:我是使用自己配的H2O2,那我試試新鮮的
推 kakaman:煮完片子乾掉?
推 johanjohan:確定一下retrieval是不是有變弱
→ johanjohan:或是前面的福馬林固定時間太久??(如果sample是新取的)