[求救] THP-1 Cell培養

[d200190 (瞌睡熊)]

最近開始養THP-1這株細胞，學長姐的說法是這株細胞很脆弱，非常容易活化，


於是我參照ATCC建議的濃度作passage，不讓細胞濃度超過1*10^6/mL，每次passage


都稀釋到2*10^5/mL左右種下去，但是這樣他的成長非常緩慢，甚至沒有變多，貼附


到Dish上的細胞也很少表示他沒有活化，但就是不長，請教過學長姐之後，得到


的說法是起碼要種2*10^6/mL才會長比較好，請問各位有這樣的經驗嗎?因為學長姐


養起來真的看起來都要滿出來了。



另外，將Medium換成Serum free的RPMI之後，細胞會馬上貼在Dish上，但是10個小


時後似乎又正常的浮起來了，我google了一下這個現象，是看到有人有一樣的問題，


但是沒有一個好的解決方法，請問這是正常的嗎?貼了又浮起來的細胞是正常的還是


活化完又死掉的呢?學長以前沒有換完Serum free之後馬上觀察的經驗所以也無法解


答我的問題，只說細胞似乎還是活著的。

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◆ From: 118.169.228.212
→ roy047:不長會不會是細胞繼代太多次而老化呢? 自身經驗是長很快
推 jethuang:THP-1應該長很快,而且容易形成團塊,會不會cell 還在適應
→ jethuang:medium啊??mediumu 有加足夠的L-glutamine 與 glucose嗎?
→ chvkimo:細胞又飄起來  懷疑是否是死   染 trypan blue 看看
→ d200190:細胞換Serum free以後居然瘋狂的長...我該去檢查FBS了...
→ duriamon:依我的經驗,由於這株細胞養的過程會自己釋放生長因子所以
→ duriamon:開始培養的時候細胞濃度盡量越濃越好,每2~3天幫補培養基
→ duriamon:當你看到細胞長的一團一團你就成功了,之後培養時都採用補
→ duriamon:培養基的方式,每1-2星期將細胞離心繼代,但要再補一些舊的
→ duriamon:培養基(因為含生長因子)