[求救] western blot的band變長了

[ducky313 (Lara)]

請問大家

我最近在做western時band都會變得很寬

假設原本只有一公分的band跑到下膠後dye會暈開 然後佔到旁邊的位置了

壓片後band也變寬了大概是 __ 變成 ____ 這樣

請問大家這要怎麼解決 ?


我都load大約 25-30 uL 量的sample

因為蛋白量不固定所以沒有定量

是要減少loading的體積嗎 ?

謝謝大家

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◆ From: 140.116.98.126
推 roy047:臨近的空well也load等量的1X sample buffer 就可以避免暈開
→ roy047:不過load太多體積時 還是多少會暈開一點 減少體積也是方法
推 martyrtitan:沒有定量..那你怎知道蛋白質load了多少= ="
推 jasonstudio:load 25~30就算是厚膠也還是很多耶
→ ducky313:可以請問 等量的sample buffer 的原理是什麼嗎 ?
→ roy047:佔住旁邊空間 讓sample在往下跑時不易往旁擴散
→ ducky313:嗯嗯 謝謝~~