各位大大好:
我的實驗其中一步是想利用Western blot的方法看加了藥物之後是否會導致
細胞粒線體中的cytochrome c 流入 細胞質進而導致細胞死亡
而我所使用的藥物已經證實了會導致細胞死亡
但是問題如下:
要證明cytochrome c的流向要先將細胞的粒線體跟細胞質分離出來
但是我在進行分離的時候 未加藥的control組分離效果不錯
(沒被彼此汙染 壓COX-IV及tubulin證明) 不過當使用加藥組分離時
互相污染的情形就非常嚴重
想請問有沒有大大之前也遇過類似的情形? 是如何解決這類問題的呢?
我所使用的Mitochondria isolation kit廠牌為Thermo, Number為89874
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