[求救] PCR位置不對

[jkq (玩具)]

請問各位大大
最近在做ligation  insert 1k vector 7.3k
transformation後 有長一顆 就直接抽plasmid
之後拿plasmid 去PCR 發現 用vector上的primer夾出來比預計多500bp左右
但用當初夾insert的primer 又夾的出來

拿去做RE剪切 位置又高出500bp左右 切位用BamHI PstI

想請問 如果這plasmid是錯的 為什麼也能夾出insert
請各位高手賜教了  如需要什麼資訊 小弟再提出

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◆ From: 123.205.158.77
→ shenhsu:primer不夠專一 insert內容應該是錯的 訂個序就會知道了
→ shenhsu:再不然就是ligation的時候除了1k的insert不也塞了其他東西
→ shenhsu:還有就是...你確定vector上的primer跟切位是緊鄰insert的?
→ jkq:不是緊連著 我有算過 比預計多五百
推 shiningspark:送定序不就有答案了嗎? 1K也沒多少錢
→ jkq:小弟我今天要送了  謝謝各位