→ trumpet:B只是拿來染western,並沒有跑SDS-PAGE不是嗎?? 03/25 12:49
→ a90648:先染個A看看有有沒抓下來吧 03/25 12:51
→ blence:很少人忍心讓lysate室溫下被抗體抓整天,protocol有來源嗎? 03/25 13:42
→ blence:看一下你的A,B的MW,上述各抗體物種,大概就有機會知道原因了 03/25 13:45
推 soend:我會先染A 確定有抓到 再染B 另外我們是四度一晚 蛋白用室溫 03/25 16:48
→ soend:挺危險的吧? 還是有其他文獻是這樣子做的? 03/25 16:49
推 Locutus:室溫overnight?? 你的protocol哪來的… 03/26 10:45
→ b715306:Protocol是買protein A/G附的 SANTA CRUZ的 03/26 18:38
→ b715306:室溫大概25度,Protocol上寫要4度C ,但老闆是說 他以前做 03/26 18:39
→ b715306:在25度C下(也就是室溫,是ok的 03/26 18:40
推 owl628:真的很少人會把蛋白在室溫下做Co-IP..... 03/26 22:37
→ kirby0415:室溫.... 03/26 22:57
→ blence:雖然每個人都在意室溫,原po可別當真的拿ptt的推文反駁老師 03/26 23:07
推 joseph103331:問一下 染出來的kDa是否都比B小? 如果是的話.... 03/27 00:23
→ joseph103331:大概被降解的可能挺高的 03/27 00:23
→ joseph103331:還有順便確認一下Input裡面AB是否都正常呢? 03/27 00:24
→ joseph103331:你可以取一些lysate出來不加sample buffer一起擺室溫 03/27 00:26
→ joseph103331:看看室溫的影響為何.... 03/27 00:27
→ joseph103331:不過你還是照個protocol跑一遍吧 室溫這麼久 03/27 00:27
→ joseph103331:蛋白質不壞 抗體都不知道行不行了 03/27 00:27
推 apple23418:恩 你老板似乎很喜歡你,要讓你留下來慢慢做,通常prote 03/28 01:18
→ apple23418:in AG加進去後是會放4℃歐 03/28 01:18
→ b715306:恩..我是助理 不是研究生所以~跟老闆有沒有要留我下來應 03/28 11:23
→ b715306:該枚關係吧 哈哈哈... 03/28 11:24
→ b715306:還有謝謝大家,我會依照建議再做做看 03/28 11:25