[求救] Trizol抽RNA~

[hsin37 (因禍得福???)]

想請問各位前輩

使用Trizol抽"植物"RNA時

在Agaross gel 上 28s:18s rRNA的比例有辦法到1.8~2.0嗎?

最近在做real-time PCR,但是biological repeat間的error bar很大

再想是否與RNA的品質有關

文獻上說rRNA的比例要到1.8~2.0

可是我們實驗室抽出來都只有1 >"<

......我們老師說磨的時候用力一點.....就會抽得比較好.....

可是我很懷疑啊~~~

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◆ From: 133.50.190.84
→ iceking:RNA超容易degrade 也許有關~
→ huuban:是指QC的ratio嗎？那個有時候跟物種有關
→ huuban:磨得細應該是回收量比較大吧..個人認為只要有磨還是可以抽
→ emilylienya:磨到很細有用喔!以前Lab也碰過類似的問題
→ chougham:我會再用DNASE I處理~然後用PHENOL-CHLOROFORM萃一遍
→ hsin37:有做DNase處理跟再萃取，以吸光值來看是沒有問題>"<但是就
→ hsin37:好像被分解掉了~那磨sample是on ice嗎?ambion的protocol是
→ hsin37:常溫磨，我有點不太理解...這步會有很嚴重的影響嗎?
→ huuban:我習慣加液氮磨耶
→ huuban:你有gel圖可以讓大家看看嗎？
推 kunhan1013:液態氮磨 +1
推 oscarcc:你之後有用phenol/chloroform 嗎?
→ oscarcc:記得離心後不要吸到下層的有機層，祝順利