[求救] Raw 264.7 培養時出現plaque

[amebakid (華氏溫度￾N￾ ￾N N)]

我現在正在養RAW 264.7,可是一直出狀況,真的不知道要怎麼辦了.

我的RAW 264.7是從之前實驗室stock解凍的,代數大概是20左右,
前面幾個passage都很正常,細胞數跟形態都沒有問題,
可是大概到了解凍後第7-8代時(細胞代數27左右),
第一次在flask中發現一兩個像是plaque的形成.
就是flask其他地方都是滿的,不過中間就有兩個圓圓的小洞沒有細胞生長

問過教授教授要我先繼續subculture,
可是subculture發現plaque變多了.
整個狀況就跟傳染病一樣.

後來我們直接從ATCC再訂一次細胞,
這次更慘,recover後一代就出現類似plaque的狀況.
這次我用了全新配的medium.

medium:DMEM +10%FBS +1%pen/strep +1%HEPES

Flask: T75 and T150

passage:用scraper將細胞刮下.

plaque形成時的狀況:medium很清澈,ph值也在正常範圍內.
                   顯微鏡下的細胞大部分都是圓圓亮亮的.
                   也沒有看到除了細胞以外的東西.

我想問一下有沒有人有遇到過類似的問題?
或是有人知道是甚麼原因造成的,我真的抓到頭快破了T_T
感激不盡!!


--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 130.184.253.30
→ wangba:T75 medium加多少? 會不會是氣泡造成的?
推 d200190:猜氣泡+1
→ bigbear33:氣泡
推 lesswind:氣泡!