推 williamyang:Agilent之前是跟威健買的 05/08 11:36
→ silverberry:謝謝樓上^^ 05/08 12:02
→ blence:除了威健,這幾個月分別問過這兩家,台灣默克也可以賣 05/08 12:05
→ blence:關鍵是價格,只能尋價才知道 05/08 12:05
→ silverberry:了解^^ 感謝 b 大~ 05/08 13:08
→ silverberry:回報一下，價差真的蠻大的 Orz不過最近有生醫年會促銷 05/08 20:09
推 abcam:有些時候...原廠賣的比代理商還貴!!!!!!! 05/08 21:11
推 aggaci:不需要特別買kit...你只需要一個很強的PFU 05/09 17:28
推 puec2:樓上不要害人 不常用的人還是乖乖用kit就好 05/10 16:56
推 aggaci:什麼害人??我就是這樣做的 哪裡害到人??! 05/11 13:18
→ aggaci:那kit裡面你你就只需要PFU 我說的哪邊不對 05/11 13:19
→ silverberry:我之前是用傳統 2 step PCR~ 相較之下 kit 可以省下 05/12 19:10
→ silverberry:一些操作步驟~所以才希望可以用 kit 做做看。 05/12 19:11
→ silverberry:我之前有聽其他實驗室的學長姐用強力 pfu 也能做 05/12 19:12
→ silverberry:只是因為我現在要做的目標載體比較大，所以才想用 05/12 19:13
→ silverberry:商業化好的 kit。 05/12 19:14
→ silverberry:看 kit 的說明書寫 dNTP mix 和 DpnI 是為 kit 最佳 05/12 19:16
→ silverberry:化過的。不知道有什麼小技巧可以自己 home-made? 05/12 19:17
→ silverberry:喔對了，我沒有用他們的 XL10。用 DH5 alpha 也 ok~ 05/12 19:18
推 puec2:我沒有說不行 只是不推薦新手用 05/12 20:40
→ puec2:能home made很厲害 不代表別人也"應該"要自己搞 05/12 20:41
→ puec2:條件不一樣 你手上很容易做出來的東西 別人可能搞半天 05/12 20:42
→ puec2:搞不出來 何苦呢? 05/12 20:42
→ silverberry:謝謝 p 大~ 我知道了~ 05/12 20:50
→ blence:a兄很明顯不是說2 step PCR,kit的東西可以分開買,DpnI也是 05/12 21:24
→ blence:整套的東西都有零賣,沒有必要花昂貴的錢買kit 05/12 21:25
→ blence:什麼最佳化的,單買DpnI跟kit附的根本是一樣的東西 05/12 21:27
→ silverberry:請問如果是要單買，是買 PfuUltraII 嗎? 這樣 PCR 完 05/13 09:58
→ silverberry:產物是不是要先purification 才能下 DpnI? 05/13 09:58
推 ljii:我的經驗是Dpn1可以直接加進PCR product裡也會work. 不過有時 05/13 14:59
→ ljii:間的話多一步purify無害 05/13 15:00
→ blence:先前用過舊包裝的kit就是cycling之後直接加DpnI作用1小時阿 05/13 15:06
→ silverberry:請問可以買 N 牌的 DpnI 取代嗎? 05/13 18:59
→ puec2:這種實驗做得出來你用雜牌拼裝reagent也做得出來 做不出來你 05/14 16:37
→ puec2:全新kit都用完也是做不出來 05/14 16:37