[求救] 利用BSA與奶粉blocking步驟是否一樣?

[jajshigogo (唉唷喂~)]

大家好

我們實驗室目前是用安佳脫脂奶粉+TBST blocking 室溫1小時後上一抗
抗體也是泡在含0.1%奶粉的TBST中 不reuse

我之後會做到磷酸化抗體 所以會用BSA blocking
網路查一般是使用 5% BSA blocking

我的問題是 5% BSA 大家是用PBST or TBST配製?
也是blocking 1小時嗎?

抗體泡在5% BSA後可以reuse使用
是保存在4度就可以了?
請問可以reuse幾次?

抱歉 問題有點多



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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 120.114.181.44
→ a90648:已經知道要用BSA了就不要用"P"BST囉!!
→ blence:雖然磷酸化抗體建議用BSA,但CST的好幾支用milk+PBST比BSA+
→ blence:TBSorTBST好看多了
→ blence:也有遇到用milk不ok,BSA也更糟,最後用non-peptide解決的
推 leoblack:Datasheet寫可以用milk的就用~有些磷酸化抗體可用
推 nk12914:小弟不才~請問為何用BSA就不要用PBST了呢?
→ nk12914:還是因為要看磷酸化蛋白，所以才不要用PBST?
→ a90648:主要是怕PBST干擾啦!!
推 mango1986:用TBST配/我們lab 若是reuse會放-20
→ snow200272:tbst/存-20reuse次數應該是看你抗體好壞吧。